安息香

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NC克隆一NimbleClonin [复制链接]

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分子克隆是分子生物学中最基本的技术之一,对推动生物技术进步至关重要。目前已有多种分子克隆技术被开发出来,每一种方法都具有一定的局限性,后基因组时代的主要目标之一是对基因进行功能研究。因此,开发用于转基因研究的快速有效、可标准化操作的分子克隆系统十分重要。

年1月15日,中国热带农业科学院热带生物技术研究所言普等科研人员在FrontiersinBioengineeringandBiotechnology发表了题为“NimbleCloning:ASimple,Versatile,andEfficientSystemforStandardizedMolecularCloning”的研究论文,该研究开发了一种命名为NimbleCloning的新型标准化分子克隆技术(简称NC克隆)。

NC克隆系统具有如下优点:

NC克隆与目前很多国内公司销售的一步克隆(或称快速克隆、无缝克隆)试剂盒以及国外公司的Gibson、In-Fusion试剂盒在克隆原理上相似,都是基于重叠DNA序列(20bp左右)介导的同源拼接。NC克隆与目前的区别和优点有3个方面:

1.简单。载体直接用于克隆反应,不需要酶切回收,真正的一步克隆!不仅省时省力(省去载体酶切和回收步骤)、省经费(无需购置一系列内切酶),还提高了克隆效率和克隆成功率(减少了操作步骤,降低了操作失败的风险,比如酶切不充分、酶切回收浓度低等问题)。

2.标准化。所有系统载体带有相同的通用接头序列,一个基因只需一对引物就可以克隆到系统所有载体。

3.灵活。既可使用通用接头进行标准化克隆,也可将接头设计在通用接头外围进行无缝克隆,克隆位点处不想要的序列在克隆反应中消除,真正的无缝克隆!

NimbleCloning(NC克隆)载体免费共享

目前NC克隆系统有60多个表达载体,包括原核表达、酵母双杂交、酵母单杂交、植物超过表达、植物RNAi、植物亚细胞定位、植物BiFC、植物基因编辑、植物VIGS、植物启动子活性分析、哺乳动物表达载体等,初步形成了一个标准化的克隆系统,为基因功能研究提供了一个便利的平台。该套载体向科研人员免费开放共享。请把需要的载体填到载体转移协议(MTA),签字后(如学生申请需要导师签字)将电子版发送到邮箱biodata-tech

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